Dados do Trabalho

Título/Title/Titulo

Imunossensor Para Identificação De Células-Tronco Mesenquimais De Coelho

Introdução/Introduction/Introdución

Diante do crescente uso de células-tronco em medicina regenerativa aliada a importância de diagnóstico rápido, os imunossensores surgem como ferramentas que propiciam rapidez, seletividade e sensibilidade. Foi investigada a construção de um imunossensor para identificação de células-tronco mesenquimais de coelho frente à inexistência no mercado, de marcadores específicos para a espécie.

Objetivos - Metodologia - Resultados - Discussão dos Resultados/Objectives - Methodology - Results - Discussion of Results/Objetivos - Metodología - Resultados - Discusión de los resultados

Objetivo: Com o objetivo de identificar a célula-tronco mesenquimal (CTM) em amostras biológicas, foi proposto a construção de filmes pela técnica layer-by-layer (LbL) com solução de fibroina de seda, PEI e quitosana cada qual associado com anticorpo monoclonal de especificidade contra CTM produzido home made (HM) para aplicação em imunossensores eletroquímicos. Metodologia: Inicialmente foi caracterizado o anticorpo monoclonal produzido por técnicas imunoquímicas. A classe do anticorpo produzido é IgG1κ com especificidade anti-CD 90. O crescimento dos filmes foi confirmado por voltametria cíclica (VC) pela área dos voltamogramas. Resultados e Discussão: A distorção dos voltamogramas foi observada com maior adsorção, considerado como cobertura completa do eletrodo. Foi padronizado e produzido o biofilme de bicamadas para fixação dos anticorpos monoclonais murinos anti-CD90 HM com solução de quitosana. A análise dos resultados obtidos com imunossensor comparando-se com a citometria de fluxo identificam a elevada sensibilidade do mesmo para a confirmação da presença de CTM em amostras biológicas, havendo necessidade de mais desenvolvimento para a quantificação das células. A partir de uma concentração de 103 CTM e leitura em 20 minutos já se obtém resposta evidenciando o reconhecimento específico de CTM de coelho, rato, cavalo e humano, de menor concentração celular do que a técnica gold standard por citometria de fluxo. Análises estatísticas definem que para obter o melhor rendimento do imunossensor o tempo de incubação ideal é de 30 minutos.

Considerações Finais/Final considerations/Consideraciones finales

Conclusão: A detecção eletroquímica da solução de anticorpos anti-CD90 HM foi feita por VC, e foi observada uma mudança nas correntes obtidas em potenciais positivos, principalmente em 0,28V e também da área dos voltamogramas.

Palavras-chave/Key words/Palabras clave

Imunossensores. Célula-Tronco Mesenquimal. Anticorpos monoclonais. Biomarcadores. Filme automontado