Dados do Trabalho

Título/Title/Titulo

Transplante Ortotópico De Traquéias Preparadas Por Técnicas De Engenharia Celular: Modelo Em Coelhos

Introdução/Introduction/Introdución

Tendo em vista o desafio do tratamento de injúrias traqueais e o progresso na produção desse órgão por técnicas de engenharia de tecidos, faz com que o interesse nessa área cresça de forma considerável, já que ainda não há um tratamento padrão descrito na literatura acerca das lesões traqueais extensas.

Objetivos - Metodologia - Resultados - Discussão dos Resultados/Objectives - Methodology - Results - Discussion of Results/Objetivos - Metodología - Resultados - Discusión de los resultados

Assim, este estudo teve como objetivo a construção de modelo de traqueia para enxerto utilizando técnicas de engenharia de tecidos. Para tanto, foram realizados 5 e 10 ciclos de descelularização nas traqueias de coelhos doadores seguindo etapas: congelamento/descongelamento sem adição de nenhum crioprotetor, banho ultrassônico no aparelho Ultrasoniccleaner (Uniquemodel USC 1400®) na frequência de 40 Khz durante 10 minutos, irradiação utilizando LED com comprimento de onda de 450nm ± 20nm na dose de 90 J/cm2 totalizando 60 minutos de exposição, adição do detergente deoxicolato de sódio a 4% sob agitação a 180 rpm no C24 Incubatorshaker durante 48 horas. Paralelamente, foram realizadas expansão e caracterização das células-tronco mesenquimais dos coelhos receptores com posterior diferenciação dessas células em condrócitos e células de músculo liso. Finalmente, foi realizada a rescelularização das traqueias com aplicação das células-tronco mesenquimais, dos condrócitos e das células de músculo liso dos coelhos receptores nas superfícies externas dos arcabouços produzidos para os transplantes traqueais.

Após 5 ciclos repetidos do protocolo de descelularização utilizado, ainda é possível observar células epiteliais respiratórias e condrócitos remanescentes nas traqueias. Porém, a repetição de 10 ciclos do mesmo protocolo de descelularização remove completamente as células epiteliais e reduz a quantidade de condrócitos. Os animais que foram transplantados com as traqueias descelularizadas com 5 ciclos vieram a óbito após 10-12 dias devido à rejeição pela presença das células epiteliais dos coelhos doadores. Os animais que foram transplantados com as traqueias descelularizadas com 10 ciclos não apresentaram sinais de rejeição, porém, vieram a óbito após 40-90 dias devido à falta de regeneração epitelial. O epitélio traqueal é a área mais imunogênica da traqueia, ou seja, a área capaz de provocar uma resposta imunológica, o que ocorreu na primeira etapa. Entretanto, sua ausência também apresenta algumas desvantagens como ocorrência de infecções e formação de supuração aguda na luz traqueal, dado observado na segunda etapa do trabalho.Não foi possível a realização do cultivo das células epiteliais de todos os animais devido à frequência de contaminações de difícil controle. A regeneração epitelial é essencial para que não ocorra a proliferação fibroblástica. A luz traqueal apresenta células produtoras de muco e células ciliadas responsáveis pela limpeza; se as células ciliadas não se apresentarem de forma viável podem ocorrer episódios de pneumonia e obstrução traqueal recorrente.

Considerações Finais/Final considerations/Consideraciones finales

O processo de descelularização utilizado é capaz de remover as células epiteliais da traqueia de coelhos após 10 ciclos, o que evita o processo de rejeição pós-transplante, porém, posteriormente, a presença do epitélio respiratório é essencial para que não ocorra a obstrução do enxerto durante a cicatrização. Sendo assim, será necessário realizar outras investigações na área, a fim de se prolongar a vida útil desses enxertos in vivo.

Palavras-chave/Key words/Palabras clave

Transplante, Scaffold, Traquéia, Engenharia de tecidos