Dados do Trabalho

Título:

OBTENÇAO DE CELULAS FECAIS ESFOLIADAS VIAVEIS UTILIZANDO CAPRINOS COMO MODELO EXPERIMENTAL PARA ESPECIES SELVAGENS

Resumo:

A obtenção de células vivas de cervídeos têm se mostrado uma tarefa complexa, dadas as características comportamentais e ecológicas das espécies. Entretanto, este material se mostra fundamental para a consecução de novos conhecimentos a nível citogenético e para a conservação da diversidade genética de populações. Assim, o uso de caprinos como modelo experimental seria interessante, uma vez que é uma espécie taxonomicamente próxima aos cervídeos e onde há maior facilidade para a obtenção de amostras e controle experimental. A fragmentação e perda de habitat tem gerado uma grande pressão sobre as espécies de cervídeos, provocando segregação entre as populações, diminuindo as trocas gênicas e a diversidade genética, aumentando endogamia e, consequentemente, levando a um maior risco de extinção. Os cervídeos têm importantes problemas em sua taxonomia, devido à alta diversidade cariotípica, onde há variações ocorrendo tanto em nível interespecífico, podendo também ser possível observar polimorfismo cromossômico em nível intraespecífico, onde há disparidade no número de cromossomos e na presença (e quantidade) de cromossomos supranumerários. A possibilidade na obtenção das células vivas a partir de uma fonte não-invasiva tornaria possível que houvesse obtenção celular de um grande número de indivíduos de vida livre, o que garantiria material para estudos citogenéticos, bem como recursos genéticos representativos das populações selvagens sem que houvesse a necessidade de captura dos indivíduos. Por isso, as células esfoliadas que são encontradas nas fezes aparecem como uma matriz interessante. Utilizou-se 8 animais pertencentes ao setor de caprinocultura alocados na Universidade Federal da Paraíba - Campus II. As amostras foram encaminhadas ao laboratório, submetidas a manutenção em temperatura ambiente ou armazenadas em refrigeração, lavadas, processadas e analisadas após períodos de 1h, 2h, 4h, 6h, 12h e 24h para ambos os tratamentos (temperatura ambiente e refrigeradas). Foi possível a realização de coletas de todos os animais, totalizando 56 amostras e havendo a presença de células viáveis em todas elas. Observou-se que a grande maioria das células analisadas se tratavam de colonócitos, tanto isolados quanto agregados, além de ter-se percebido que quanto mais escuro foi classificado o pellet, maior foi a quantidade de células totais e viáveis obtidas, sugerindo que a presença do material fecal não afetou na qualidade das células, não ocasionando uma mortalidade delas. O tempo teve efeito significativo sobre a quantidade de células totais e viáveis obtidas, ou seja, quanto mais tempo se passou do momento da defecação até a avaliação, menor a quantidade de células obtidas e de células viáveis. Foi possível observar também que apesar da quantidade de células totais ser maior em temperatura ambiente, há uma curva de queda maior na sua sobrevivência com o passar do tempo em relação às amostras que foram mantidas sob refrigeração. Concluiu-se então que as fezes são, de fato, uma fonte adequada para obtenção de células esfoliadas viáveis e se faz necessário que as pesquisas se desenvolvam e se encontre uma forma eficiente para o isolamento das células viáveis do material fecal, para que assim seja possível estabelecer seu cultivo in vitro.
Palavras-chave: citogenética, viabilidade celular, Trypan Blue, cervidae.

Financiamento:

Área

Conservação